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安譜方案丨食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素檢測的整體解決方案(二)

更新時間:2026-01-26      點擊次數:864

奶粉中蠟樣芽孢桿菌嘔吐毒素

測定的整體解決方案

—T/WSJD 57-2024


在《食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素檢測的整體解決方案(一)》中,我們系統介紹了蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素的危害及安譜實驗所提供的整套產品與技術支持方案,覆蓋了從標準物質、前處理耗材到分析方法的完整檢測體系,實現一站式服務。

作為該體系的進一步深化與實踐,本方案(二)聚焦于團體標準 T/WSJD 57-2024《食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素的測定》,特別針對乳制品尤其是奶粉基質中該毒素的檢測難點,提供一套經實驗驗證、完整可靠的實驗方案。使用CNW HLB Pro SPE小柱、ANPEL對應標準品以及CNW UPLC C18液相色譜柱等產品進行奶粉中蠟樣芽孢桿菌的檢測,回收率90%以上滿足標準要求,助力實驗室高效應對奶粉及相關制品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素的檢測挑戰。


一、樣品前處理

稱取1g(精確至0.01g)均質后的食品樣品置于15mL離心管,加入內標標準工作液(0.1mg/L)20μL,靜置30min后,準確加入5.0mL乙腈,渦旋混勻30s,超聲30min。4℃下12000r/min離心10min。轉移全部上清液至15mL離心管中,加入5.0mL水,渦旋混合30s,待HLB柱凈化。

標準物質:

CDAA-S-290215-JA-1.2ml 乙腈中蠟樣芽孢桿菌嘔吐毒素(合成)標準溶液 100mg/L于乙腈,1.2ml

CDAA-S-290216-JJ-1.2ml 乙腈中蠟樣芽孢桿菌嘔吐毒素-13C6 標準溶液  20mg/L于乙腈,1.2ml

SPE柱

SBEQ-CA6685 Poly-Sery HLB Pro SPE 小柱,200mg/6mL

活化:3mL甲醇;

平衡:3mL純水依次活化;

上樣:取食品樣品提取液上樣(如果上柱溶液粘度較大,過濾較為緩慢,可以1.2mL/min速度抽濾過柱),待上樣液過柱;

淋洗:3mL純水淋洗小柱;

洗脫:5mL甲醇洗脫,收集全部洗脫液,氮氣濃縮至近干,殘渣用1mL初始流動相(流動相A與B體積比為8:2)復溶,過微孔濾膜供上機測定。


二、儀器條件









液相條件

a) 色譜柱:Athena UPLC C18液相色譜柱(PN:LAEQ-2110HA 2.1×100mm,1.7μm,130A或PN:LAEQ-2110HU 2.1×100mm,1.8μm,300A);

b) 流動相:流動相A相為0.1%甲酸乙腈溶液,B相為0.1%甲酸-2.0mmol/L乙酸銨水溶液;

c) 流速:0.35mL/min;

d) 柱溫:40℃;

e) 進樣量:5μL;

f) 梯度洗脫程序見表1。

表1










質譜參考條件

a) 離子化模式:電噴霧電壓離子模式(ESI?);

b) 質譜掃描方式:多反應監測(MRM);

c) 毛細管電壓:3.5kV;

d) 離子源溫度:150℃;

e) 脫溶劑溫度:500℃;

f) 脫溶劑氣流量:1000L/h;

g) 碰撞室壓力:0.36Pa。



三、實驗譜圖

圖1 標準曲線

安譜方案丨食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素檢測的整體解決方案(二)

圖2 奶粉基質空白譜圖

安譜方案丨食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素檢測的整體解決方案(二)

圖3 奶粉基質加標譜圖(2μg/kg)



四、實驗數據

安譜方案丨食品中蠟樣芽胞桿菌嘔吐毒素檢測的整體解決方案(二)


五、產品推薦